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化學發(fā)光試劑操作的規(guī)范性

更新時間：2015-10-20瀏覽：2557次

1. 保存條件：

1.1 試劑盒應放置于2～8℃冰箱中存放。

1.2 試劑盒在取用過程中禁止顛倒，以避免試劑被污染。

1.3 有特殊要求的試劑應嚴格按照操作說明書要求的保存條件保存。

2. 保存時間：

2.1 未開封試劑盒于2～8℃保存時，可在有效期之內(nèi)正常使用。

2.2 已開封試劑盒每次使用后需及時放回2～8℃冰箱內(nèi)保存，應盡可能在開封后1個月內(nèi)使用。（按說明指示的開封的半成品有效期計算，盡量在半成品zui短的有效期內(nèi)用完）

化學發(fā)光試劑的準備

1、實驗前，先將實驗中所需的所有試劑及待測樣品從冰箱中取出，待溫度與室溫（25℃）平衡1小時以上后使用。加樣前應將所用試劑和待測樣本分別充分混勻。

2、酶結(jié)合物和抗體混勻時，切忌產(chǎn)生大量氣泡。

3、實驗中用于凍干品復溶和稀釋濃縮洗滌液所用的蒸餾水或去離子水應保證質(zhì)量。

4、凍干品加入蒸餾水或去離子水后，應蓋上膠塞后靜置，待固體物質(zhì)*溶解后，再將試劑瓶反扣在實驗臺上，讓附著在瓶蓋上的固體物質(zhì)溶解，然后充分混勻后待用。

酶促化學發(fā)光測定的主要問題

1、酶促化學發(fā)光一步法的“ HOOK EFFECT” 問題

2、酶促化學發(fā)光測定出現(xiàn)假陽性的原因

2.1操作及儀器因素：加樣、洗板、自動化加樣系統(tǒng)的標本間“交叉污染”；

2.2標本因素： RF、補體、異嗜性抗體、動物抗原、動物抗體、高濃度Ig、溶血、細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全。

3、酶促化學發(fā)光測定出現(xiàn)假陽性的原因

3.1操作、試劑及儀器因素：標本未加、試劑過期或變質(zhì)、儀器針孔堵塞、標本“交叉污染”；

3.2標本因素：補體、自身抗體、反復凍融

4、綜上所述，盡管化學發(fā)光免疫分析的操作步驟非常簡單，但有可能會影響測定結(jié)果的因素卻較多，分布在測定操作的各步之中，尤以加樣、溫育和洗板為甚。